制備液相色譜儀是一種用于分離和純化化學(xué)或生物混合物中目標(biāo)成分的實(shí)驗(yàn)室儀器,其核心原理是利用不同物質(zhì)在固定相和流動(dòng)相之間的分配系數(shù)差異實(shí)現(xiàn)有效分離。
制備液相色譜基于液相色譜分離原理,利用樣品中各組分在固定相和流動(dòng)相之間分配系數(shù)的差異,在色譜柱中實(shí)現(xiàn)分離。當(dāng)樣品被流動(dòng)相帶入色譜柱后,各組分在固定相和流動(dòng)相之間發(fā)生連續(xù)的溶解、吸附、解吸等相互作用。分配系數(shù)大的組分更傾向于停留在固定相上,隨流動(dòng)相遷移的速度慢;分配系數(shù)小的組分則更傾向于溶解在流動(dòng)相中,遷移速度快。不同組分因遷移速度差異,先后從柱尾流出,通過(guò)檢測(cè)器識(shí)別后,由餾分收集器收集目標(biāo)組分的流出液,即可獲得高純度的制備樣品。
結(jié)構(gòu)組成
溶劑輸送系統(tǒng):由高壓輸液泵組成,能提供穩(wěn)定流速,適應(yīng)較大流量范圍,保證流動(dòng)相輸送平穩(wěn)。
進(jìn)樣系統(tǒng):包括手動(dòng)或自動(dòng)進(jìn)樣器,可容納較大體積樣品,通常為幾百微升至幾毫升,避免多次進(jìn)樣導(dǎo)致的誤差。
色譜柱:制備型色譜柱內(nèi)徑一般為 10-50mm,長(zhǎng)度 10-30cm,固定相填料與分析柱類似,如 C18 反相柱、硅膠正相柱等,但粒徑稍大,多為 5-10μm,兼顧分離效率和柱壓。
檢測(cè)系統(tǒng):常用紫外 - 可見(jiàn)檢測(cè)器,也可搭配示差折光檢測(cè)器、蒸發(fā)光散射檢測(cè)器等,用于監(jiān)測(cè)組分流出信號(hào)。
餾分收集系統(tǒng):可根據(jù)檢測(cè)器信號(hào)自動(dòng)或手動(dòng)收集目標(biāo)組分,能按時(shí)間、體積或峰信號(hào)觸發(fā)收集,保證目標(biāo)組分的有效捕獲。
結(jié)構(gòu)組成
溶劑輸送系統(tǒng):由高壓輸液泵組成,能提供穩(wěn)定流速,適應(yīng)較大流量范圍,保證流動(dòng)相輸送平穩(wěn)。
進(jìn)樣系統(tǒng):包括手動(dòng)或自動(dòng)進(jìn)樣器,可容納較大體積樣品,通常為幾百微升至幾毫升,避免多次進(jìn)樣導(dǎo)致的誤差。
色譜柱:制備型色譜柱內(nèi)徑一般為 10-50mm,長(zhǎng)度 10-30cm,固定相填料與分析柱類似,如 C18 反相柱、硅膠正相柱等,但粒徑稍大,多為 5-10μm,兼顧分離效率和柱壓。
檢測(cè)系統(tǒng):常用紫外 - 可見(jiàn)檢測(cè)器,也可搭配示差折光檢測(cè)器、蒸發(fā)光散射檢測(cè)器等,用于監(jiān)測(cè)組分流出信號(hào)。
餾分收集系統(tǒng):可根據(jù)檢測(cè)器信號(hào)自動(dòng)或手動(dòng)收集目標(biāo)組分,能按時(shí)間、體積或峰信號(hào)觸發(fā)收集,保證目標(biāo)組分的有效捕獲。
制備液相色譜儀作為分離純化的核心工具,正從實(shí)驗(yàn)室輔助設(shè)備向產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)裝備升級(jí)。隨著智能化、綠色化技術(shù)的滲透,其操作門檻降低,數(shù)據(jù)可靠性提升,同時(shí)連續(xù)化與迷你化趨勢(shì)進(jìn)一步拓展應(yīng)用邊界。未來(lái),隨著國(guó)產(chǎn)加速與核心部件國(guó)產(chǎn)化突破,制備液相色譜儀將在生物醫(yī)藥、新材料等領(lǐng)域發(fā)揮更大價(jià)值,推動(dòng)分析實(shí)驗(yàn)室向可持續(xù)方向邁進(jìn)。